Dil(細胞膜紅色熒光探針)
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別名:1,1'-雙十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚菁高氯酸鹽;DiI 高氯酸鹽;DiI;DiIC18(3)
分子式:C59H97ClN2O4
CAS: 41085-99-8
簡介:親脂性羰花青染料(Lipophilic Carbocyanine Dyes)初用于組織制備時通過逆行標記神經元細胞成像,而現在它們已經廣泛應用于標記組織中神經元和懸浮培養細胞。羰花青染料有著很長的親脂性烴鏈,使得這類染料能夠的染色細胞膜,胞膜的著色是高度穩定的,幾乎沒有染料能在細胞之間遷移。
部分羰花青染料在熒光染料中具有的吸收能力,它們在脂質雙分子層中有強熒光。而當它們存在于水相時基本不發或只有微弱的熒光
DiI即DiIC18(3),全稱為1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine
perchlorate,是常用的細胞膜熒光探針之一,呈現橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料,進入細胞膜后可以側向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。
DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱,僅當進入到細胞膜后才可以被激發出很強的熒光。DiI被激發后可以發出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結合后的激發光譜和發射光譜參考下圖。其中,大激發波長為549nm,大發射波長為565nm
DiI可以溶解于無水、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發現較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。
DiI被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term
tracer)。DiI通常不會影響細胞的生存力(viability)。被DiI標記的神經細胞在體外培養的條件下可以存活長達4周,在體內可以長達一年。DiI在經過固定的神經元細胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day,在活的神經元細胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
DiI除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence
Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
用于細胞膜熒光標記時,DiI的常用濃度為1-25μM,常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細胞或組織,染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定,使用其它不適當的固定液會導致熒光背景較高。
橘紅色染料DiI及其波長較長的衍生物DiD 和 DiR都是屬于indo羰花青染料的亞綱,比綠色熒光染料DiO(DiO屬于ox羰花青染料的亞綱)使用更為廣泛,這是因為DiO比DiI及其衍生物難溶于水
保存條件:
4℃避光保存,一年有效。配制的儲存液-20℃避光保存,半年有效。
注意事項:
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
From Sigma 42364
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