免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(western blot),它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。western blot是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡(western blot)常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。
服務要求:
1. 樣品要求:
組織樣品:每份樣品約(250~500mg)新鮮或正確保存的,
細胞樣品:每份樣品約1×106~1×107細胞數
2.客戶需提供有效的一抗,或由公司代購進口原裝抗體,
3.客戶需提供欲檢測目的蛋白的詳細背景資料。
操作程序:
1.總蛋白制備
2.比色法測定蛋白含量
3.變性聚不連續凝膠電泳(SDS-PAGE) 凝膠電泳,分離蛋白質
4.蛋白質轉印電泳印跡法
5.固相免疫檢測:封閉、一抗雜交、二抗雜交
6.化學發光法檢測:顯色、曝光、顯影定影
7.結果數據分析:膠片掃描,軟件分析
8.提供實驗報告,包括詳細的實驗方法及免疫印跡實驗結果的相關圖表。
收費標準:
每張膜上做一種目的蛋白和相應的內參蛋白。每張膜上可以做8個樣品(樣品數小于8個按8個計)。每張膜的費用是:1500.00元。一抗另計,其它試劑免費,一抗訂購時間約為3周。
時間:約2-3周(不包含代購抗體的時間)。
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